本发明公开了一种双层叠印光响应二维码及其制备方法。该双层叠印光响应二维码包含背衬层（1）、第一层二维码（2）和第二层二维码（3）；所述第一层二维码（2）印在背衬层（1）的表面，第二层二维码（3）叠印在第一层二维码（2）的上表面，在可见光下，只显示第一层二维码（2）。本发明方法将生产的两种二维码排序后，依次印刷在背衬层上，得到所述双层叠印光响应二维码。本发明的双层叠印光响应二维码可实现双层信息的显示，且显示过程互不干扰，防伪效果显著；本发明的制备方法操作简单，材料来源广泛，制备成本低，可实现产业化生产，为实现二维码的高度防伪及功能化提供了一种新的思路和途径。