本发明属于生物化学的技术领域，公开了一种用于生物分子固定的活化炔修饰表面玻璃材料及表面改性方法。方法：1)对玻璃材料进行表面羟基化处理，获得表面羟基化玻璃材料；2)采用氨基硅烷化试剂处理表面羟基化玻璃材料，获得氨基修饰的玻璃材料；3)采用二元炔基化合物处理氨基修饰的玻璃材料，获得活化炔修饰的玻璃材料。本发明通过表面改性成功在玻璃表面修饰了活化炔，并将其用于固定生物分子，实现了蛋白和多肽的表面化学固定。同时本发明的表面改性方法，条件温和，反应迅速，操作简单，而且在固定生物分子时不用对生物分子进行前修饰，无需催化剂，反应高效。