本发明公开了一种细胞焦亡药物前药及其制备方法与细胞焦亡药物。本发明的细胞焦亡药物前药能通过靶向线粒体，造成线粒体破坏，释放出细胞色素c，激活Caspase3剪切GSDME，使细胞发生焦亡。该药物前药(NCyNH2)对肿瘤细胞具有选择性，降低对正常细胞的损伤，还可以通过自身荧光的恢复来检测其活化情况。在瘤内给药后，该药物前药可以有效调节肿瘤免疫微环境，激活T细胞介导的抗肿瘤免疫反应。该分子在线粒体靶向，抑制细胞呼吸，诱导细胞焦亡，改善肿瘤免疫微环境，激活T细胞介导的抗肿瘤免疫反应等方面具有巨大的应用前景。