本发明属于中药领域，公开了一种绞股蓝黄酮类化合物及其制备与在抗肿瘤药物中的应用。方法：(1)采用乙醇水溶液加热回流提取绞股蓝粗粉，离心，浓缩，得到绞股蓝乙醇浸膏；(2)将浸膏用水溶解，过滤，将滤液采用石油醚萃取，将下层水相采用乙酸乙酯萃取；将乙酸乙酯相进行减压浓缩，烘干，在硅胶柱中用氯仿?甲醇的混合溶剂等度洗脱，得到若干馏分；(4)将上述馏分过凝胶柱，甲醇洗脱，收集比拟值相等的馏分；(5)将馏分过ODS柱，用甲醇?水等度洗脱，收集馏分，通过干燥得到绞股蓝黄酮类化合物。本发明的绞股蓝黄酮类化合物抗肿瘤活性高，使用剂量低，在同样剂量下的对正常人肝细胞无毒副作用。