本发明公开一种具有免疫活性的新型红托竹荪多糖及其制备方法和应用，所述方法，以红托竹荪为原料，经过如下方法制备：热水浸提、Ｓａｖｅｇｅ法除蛋白、乙醇沉淀，然后采用离子交换柱层析、凝胶过滤柱层析、超滤分离、凝胶过滤柱层析四步分离法分离纯化后获得。本发明的制备工艺合理简单，并且易于实现工业化大生产。本发明制备的新型红托竹荪多糖具有良好的免疫促进作用，可以作为肿瘤等免疫功能底下疾病的辅助治疗药物或者作为具有提高免疫力作用的功能性保健食品或食品。